1. 小鼠IgG產(chǎn)品的用途
(1)免疫反應(yīng)中的封閉劑，封閉固相材料表面，降低抗體和抗原的非特異性結(jié)合。
(2)免疫反應(yīng)中的阻斷劑，阻斷待檢測(cè)樣品中內(nèi)源性異嗜性抗體對(duì)抗原抗體的非特異性結(jié)合，提高反應(yīng)的靈敏度和特異性。
(3)在一些生化分析測(cè)試中作為IgG對(duì)照品。
(4)作為蛋白質(zhì)的穩(wěn)定劑。
(5)作為參考抗原，用于藥物試驗(yàn)中觀察免疫效果。
2. 小鼠IgG的應(yīng)用場(chǎng)景和原理
作為免疫反應(yīng)中的封閉劑和阻斷劑，小鼠IgG適用于幾乎所有的免疫檢測(cè)分析，包括酶聯(lián)免疫吸附、側(cè)向流免疫層析、化學(xué)發(fā)光免疫分析、蛋白免疫印跡、膠體金免疫層析等，是IVD領(lǐng)域的通用原料，被廣泛應(yīng)用于疾病診斷試劑盒、檢測(cè)試紙、醫(yī)學(xué)檢測(cè)、實(shí)驗(yàn)室分析等場(chǎng)景。
小鼠IgG具體應(yīng)用場(chǎng)景主要包括以下幾個(gè)方面：
(1)免疫診斷試劑
鼠源的IgG被用作免疫分析試劑。通過使用特異性的抗體與鼠源IgG結(jié)合，可以檢測(cè)目標(biāo)蛋白質(zhì)在樣本中的存在并確定其數(shù)量。
應(yīng)用場(chǎng)景：ELISA、Western Blotting、免疫組化等抗原檢測(cè)
原理：作為標(biāo)記過的抗體，與檢測(cè)抗體(直接檢測(cè))或一組匹配的未標(biāo)記檢測(cè)抗體和標(biāo)記二抗(間接檢測(cè))檢測(cè)病人樣本中的的抗體。
(2)阻斷劑、封閉劑
在某些免疫反應(yīng)實(shí)驗(yàn)中，背景信號(hào)會(huì)干擾所需的結(jié)果準(zhǔn)確性，研究人員使用小鼠IgG來消除這種背景信號(hào)，小鼠IgG會(huì)結(jié)合一些非特異性的受體和其他成分，從而降低背景信號(hào)，阻斷非特異性成分對(duì)檢測(cè)的干擾;此外，小鼠IgG可用于飽和固相材料表面上未被抗體包被的結(jié)合位點(diǎn)，從而防止被檢測(cè)物質(zhì)的非特異性結(jié)合，起到封閉固相表面的作用。
應(yīng)用場(chǎng)景：ELISA、膠體金、免疫熒光、疾病診斷試劑盒;
原理：在免疫診斷檢測(cè)中，經(jīng)常存在非特異性干擾影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。這種非特異性結(jié)合可發(fā)生于
a. 固相材料和非目標(biāo)蛋白質(zhì)的結(jié)合或
b. 待測(cè)樣品中存在的內(nèi)源性檢測(cè)抗體和檢測(cè)試劑中抗體的結(jié)合。
為防止非特異性結(jié)合，在固相材料包被之后使用封閉劑封閉固相材料上剩余未結(jié)合的位點(diǎn)，在準(zhǔn)備檢測(cè)樣本的過程中使用阻斷劑阻斷內(nèi)源性干擾抗體與檢測(cè)試劑抗體的結(jié)合，從而提高檢測(cè)的靈敏度和特異性，避免假陽性或假陰性結(jié)果。
樣品中的未結(jié)合的雜質(zhì)﹐如蛋白質(zhì)﹐干擾分子等和測(cè)定標(biāo)記物結(jié)合到固相材料表面并與特異性抗原-抗體反應(yīng)信號(hào)競(jìng)爭從而引起的背景噪聲和降低檢測(cè)信號(hào)。
封閉緩沖液可包被固相材料上的開放位點(diǎn)從而防止未結(jié)合的雜質(zhì)與開放位點(diǎn)的非特異性結(jié)合。小鼠IgG作為一種理想的封閉劑，一方面能夠有效地封閉固相材料表面疏水性和親水性位點(diǎn)。另一方面可以作為—種穩(wěn)定劑用以防止蛋白在與固相材料的表面反應(yīng)時(shí)發(fā)生變性。
理想封閉劑具有以下特征:
a. 有效地阻斷測(cè)定反應(yīng)物非特異性結(jié)合到固體材料表面;
b. 不影響已包被到固體材料表面的試劑有效成分，可以起到試劑有效成分在固相表面穩(wěn)定劑(防止變性)的作用;
c. 不與其它試劑有效成分發(fā)生交叉反應(yīng);
d. 不具有酶活性并由此可能與試劑中的底物反應(yīng)而使信號(hào)加強(qiáng)或降解試劑中的反應(yīng)物;
e. 每個(gè)批號(hào)批間差小。
在免疫檢測(cè)中，患者樣本中通常存在多種內(nèi)源性干擾物質(zhì)，主要是異嗜性抗體(HA)、人抗鼠抗體(HAMA)和類風(fēng)濕因子(RF)，它們通過與檢測(cè)抗體非特異性結(jié)合或發(fā)生弱交叉反應(yīng)而降低檢測(cè)的靈敏度和特異性, 導(dǎo)致假陽性或假陰性結(jié)果。
雙抗夾心抗原檢測(cè)、競(jìng)爭法和lgM捕獲檢測(cè)都易受內(nèi)源性干擾的影響，因此，想要提高免疫診斷檢測(cè)的準(zhǔn)確性和特異性，使用專門的免疫阻斷劑來降低這些非特異性干擾引起的錯(cuò)誤結(jié)果是必不可少的。
(3)流式細(xì)胞分選：
鼠源IgG通常用于流式細(xì)胞儀中用于區(qū)分不同的細(xì)胞類型和表面標(biāo)志物。其可以：
a 標(biāo)記靶細(xì)胞：在流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)中，研究人員通常會(huì)選擇一種或多種與鼠源IgG結(jié)合并高度特異性的熒光素或染料，例如FITC、PE、APC等，將其與鼠源IgG結(jié)合用于標(biāo)記靶細(xì)胞。
b. 區(qū)分靶細(xì)胞(免疫診斷)：標(biāo)記好的鼠源IgG熒光素或染料結(jié)合到靶細(xì)胞表面標(biāo)志物上后，流式細(xì)胞儀在掃描細(xì)胞時(shí)，可以根據(jù)相應(yīng)熒光素或染料的激發(fā)和發(fā)射波長區(qū)分不同的靶細(xì)胞和它們的表面標(biāo)志物。
c. 降低非特異性結(jié)合(阻斷劑)：鼠源IgG會(huì)通過其Fc受體與流式細(xì)胞試劑盒中的其他成分和細(xì)胞膜上的Fcγ受體結(jié)合，從而降低非特異性結(jié)合，使正式實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加可靠。
(4)對(duì)照鼠源IgG：
用作免疫沉淀、免疫共沉淀、染色質(zhì)免疫沉淀、免疫組化、免疫熒光、免疫印跡、等抗體相關(guān)實(shí)驗(yàn)時(shí)小鼠來源特定抗體的對(duì)照IgG。
